MÉTODO PARA MODIFICAR UM LOCUS-ALVO EM UMA CÉLULA.

IPC Classification

Priority claims

Abstract

A presente invenção se refere a métodos e composições para modificar um ou mais loci alvo em uma célula. Estes métodos compreendem o fornecimento de uma célula que compreende um primeiro polinucleotídeo que codifica um primeiro marcador de seleção funcionalmente ligado a um primeiro promotor ativo na célula, sendo que o primeiro polinucleotídeo compreende adicionalmente um primeiro sítio de reconhecimento de um primeiro agente de nuclease. Um primeiro agente de nuclease é introduzido em uma célula, sendo que o primeiro agente de nuclease induz uma incisão ou uma quebra na fita dupla no primeiro sítio de reconhecimento. É adicionalmente introduzido na célula um vetor de direcionamento que compreende um primeiro polinucleotídeo de inserção flanqueado por um primeiro e um segundo braço de homologia que correspondem a um primeiro e a um segundo sítio alvo localizados em proximidade suficiente com o primeiro sítio de reconhecimento. Pelo menos uma célula compreendendo em seu genoma o primeiro polinucleotídeo de inserção integrado no locus-alvo é identificada.