MÉTODOS PARA MODIFICAR SÍTIO ESPECÍFICO DE MOLÉCULA DE DNA ALVO, PARA OBTER COMPLEXO, EM MICRORGANISMO GENETICAMENTE MODIFICADO, PARA CLIVAR SEQUÊNCIA DE POLINUCLEOTÍDEOS E NUCLEOTÍDEOS, PARA CORTAR SÍTIO ESPECÍFICO DE SEQUÊNCIAS DE POLINUCLEOTÍDEOS E DE NUCLEOTÍDEOS, IN VITRO PARA GERAR COMPLEXOS, PARA REPROGRAMAR ESPECIFICIDADE DE COMPLEXO DE CAS9-CRRNA E PARA MODIFICAR SELETIVAMENTE SÍTIO ESPECÍFICO DE MOLÉCULA DE DNA ALVO IN VIVO, COMPLEXOS DE PROTEÍNA-RNA E DE CAS9-CRRNA, PROTEÍNA CAS9- ISOLADA E CRRNA ISOLADO

IPC Classification

Priority claims

Abstract

Métodos Para Modificar Sítio Específico de Molécula de DNA Alvo, Para Obter Complexo, em Microrganismo Geneticamente Modificado, Para Clivar Sequências de Polinucleotídeos e Nucleotídeos, Para Cortar Sítio Específico de Sequências de Polinu-cleotídeos e de Nucleotídeos, in Vitro Para Gerar Complexos, Para Reprogramar Especificidade de Complexo de Cas9-crRNA e Para Modificar Seletivamente Sítio Específico de Molécula de DNA Alvo in Vivo, Complexos de Proteína-RNA e de Cas9-crRNA, Proteína Cas9 isolada e crRNA IsoladoIsolamento ou montagem in vitro do complexo Cas9-crRNA do sistema de CRISPR3 / Cas de Streptococcus thermophilus e utilização para a clivagem de DNA transportando uma sequência de nucleotídeo complementar à crRNA e um motivo adjacente proto-espaçador. Métodos para a modificação de sítio específico de uma molécula de DNA alvo in vitro ou in vivo, utilizando uma DNA endonuclease guiado por RNA compre-endendo sequências de RNA e pelo menos um de um motivo do sítio ativo de RuvC e um motivo de sítio ativo de HNH; para a conversão de polipeptídeo Cas9 em uma nica-se clivando um filamento de DNA de filamento duplo por inativação de um dos sítios ativos (RuvC ou HNH) do polipeptídeo por, pelo menos, uma mutação pontual; para a montagem do complexo ativo de polipeptídeo-polirribonucleotídeo in vivo ou in vitro; e para reprogramar uma especificidade do complexo Cas9-crRNA in vitro e utilizando um cassete contendo uma única unidade de repetição-espaçador-repetição.