COMPOSIÇÃO DE PROTEÍNA DE FUSÃO, MOLÉCULA DE ÁCIDO NUCLEICO, VETOR DE EXPRESSÃO, COMPLEXOS DE RIBONUCLEOPROTEÍNA, E MÉTODO IN VITRO PARA MODIFICAR, VISUALIZAR, ATIVAR A TRANSCRIÇÃO OU REPRIMIR A TRANSCRIÇÃO DE UM ÁCIDO NUCLEICO ALVO

IPC Classification

Priority claims

Abstract

RESUMOPatente de Invenção: "RIBONUCLEOPROTEÍNAS EM CASCATAS MODIFICADAS E SEUS USOS". A presente invenção refere-se a um complexo associado a repetição palindrômica curta regularmente interespaçada e aglomerada (CRISPR) para defesa antiviral adaptável (Cascata); o Complexo de proteína em cascata compreendendo pelo menos as subunidades de proteína associada a CRISPR Cas7, Cas5 e Cas6 que incluem pelo menos uma subunidade com uma sequência de aminoácido adicional possuindo o ácido nucléico ou o modificador da cromatina, visualização, ativação da transcrição ou atividade da repressão da transcrição. O Complexo em cascata com atividade adicional é combinado com uma molécula de RNA para produzir um complexo de ribonucleoproteína. A molécula de RNA é selecionada para ter complementaridade substancial à sequência alvo. As ribonucleoproteínas alvejadas podem ser empregadas como ferramentas da engenharia genética para precisar o corte dos ácidos nucleicos na recombinação homóloga, união da extremidade não homóloga, modificação do gene, integração do gene, reparo da mutação ou para sua visualização, repressão ou ativação transcricional. Um par de ribonucleotídeos fundidos aos dímeros FokI pode ser empregado para gerar rupturas de filamento duplo no DNA para facilitar estas aplicações de um modo de sequência específica.