DESENVOLVIMENTO DE UM MÉTODO ELETROANALÍTICO PARA DETECÇÃO E QUANTIFICAÇÃO SIMULTÂNEA DOS BIOMARCADORES 7-METIL-GUANINA E 3-METIL-ADENINA UTILIZANDO ELETRODO IMPRESSO DE CARBONO

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Abstract

DESENVOLVIMENTO DE UM MÉTODO ELETROANALÍTICO PARA DETECÇÃO E QUANTIFICAÇÃO SIMULTÂNEA DOS BIOMARCADORES 7-METIL-GUANINA E 3-METIL-ADENINA UTILIZANDO ELETRODO IMPRESSO DE CARBONO. O pedido de patente de invenção descreve um método eletroanalítico para a identificação e quantificação simultânea das espécies metiladas do DNA, 7-metilguanina (7-mGua) e 3-metiladenina (3-mAde), utilizando voltametria de pulso diferencial (DPV). Este método baseia-se na resposta eletrocatalítica simultânea dos biomarcadores 7-mGua e 3-mAde em um eletrodo impresso de carbono funcionalizado anodicamente (aSPCE) por DPV. Diferentes variáveis experimentais foram investigadas para o desenvolvimento do método, tais como a influência da composição e pH dos eletrólitos suporte aquosos, difusão e/ou adsorção e influência de possíveis interferentes (guanina, adenina, timina e citosina) sobre os processos anódicos dos adutos sobre o aSPCE. Em condições otimizadas, a 7-mGua e a 3-mAde foram oxidadas em potenciais distintos tanto em meio ácido (pH 4,5) quanto em meio neutro, permitindo excelente separação e a detecção simultânea. O método apresentou curvas analíticas robustas: em meio ácido, para 7-mGua e 3-mAde na faixa de 1,00 - 8,00 µmol L-¹, com LOD de 0,63 µmol L-¹ e 0,61 µmol L-¹, respectivamente. Em meio neutro, a faixa para 7-mGua foi de 1,00 - 11,45 µmol L-¹, com LOD de 1,01 µmol L-¹ e para 3-mAde, de 3,33 - 11,45 µmol L-¹, com LOD de 0,54 µmol L-¹. Portanto, esta invenção propõe um método eletroquímico sensível, seletivo e rápido para a detecção e quantificação simultânea dos biomarcadores 7-mGua e 3-mAde em amostras de DNA hidrolisado, utilizando DPV em um aSPCE.