MÉTODO DE EXTRAÇÃO SELETIVA DE ÁCIDOS NUCLÉICOS – BioSelective PARA DETECÇÃO DE PAPILOMAVÍRUS HUMANO

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Abstract

MÉTODO DE EXTRAÇÃO SELETIVA DE ÁCIDOS NUCLÉICOS - BIOSELECTIVE PARA DETECÇÃO DE PAPILOMAVÍRUS HUMANO. A presente invenção incide nas áreas de biologia molecular e diagnóstico molecular in vitro, ao inovar, quando garante a extração seletiva de ácidos nucléicos dos alvos de interesse, a exemplo da extração seletiva dos ácidos nucléicos dos subtipos de HPV associados à carcinogênese do Câncer do Colo do Útero, entre outros processos neoplásicos. O método BioSelective para HPV, BioSelective-HPV, foi validado em relação à efetividade seletiva e especificidade. Para a análise de efetividade seletiva, o método BioSelective-HPV foi comparado ao método Salting Out por meio da extração dos ácidos nucléicos de 50 amostras do trato genital suspeitas de infecção por HPV. As amostras foram amplificadas pelo método qPCR/Multipex-HPV in house e os resultados foram tratados pelo teste exato de Fisher e não apresentaram diferença estatisticamente significativa, valor-p > 0,05. Portanto, não há diferença estatisticamente significativa entre os métodos de extração de ácidos nucleicos analisados. Para a análise de especificidade, o método BioSelective-HPV foi comparado ao método Salting Out por meio da extração de ácidos nucleicos de 50 amostras do trato genital suspeitas de outras Infecção Sexualmente Transmissíveis IST. As amostras foram amplificadas pelo método qPCR/Multipex-IST in house e os resultados foram tratados pelo teste exato de Fisher e apresentaram diferença estatisticamente significativa, valor-p < 0,05. A amplificação pelo método qPCR/Multiplex-IST in house ocorreu apenas nas amostras extraídas pelo método Salting Out. Portanto, o método BioSelective-HPV é especifico para detecção e genotipagem dos subtipos de HPV. Assim, o método BioSelective inova ao realizar extração seletiva de ácidos nucléicos do alvo de interesse, a exemplo do HPV. O método BioSelective garante a extração seletiva de ácidos nucléicos de diferentes origens, sendo sua característica fundamental, viabilizando à extração seletiva de ácidos nucléicos de vírus, de organismos procariontes e eucariontes, bem como, os ácidos nucléicos de organelas com celeridade, de baixo custo e com tecnologia nacional.