DILUENTE DE SÊMEN REFRIGERADO EQUINO À BASE DE LEITE DESNATADO LIVRE DE ANTIBIÓTICO, UTILIZANDO SCHINUS TEREBINTHIFOLIUS RADDI (AROEIRA)

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Abstract

DILUENTE DE SÊMEN REFRIGERADO EQUINO À BASE DE LEITE DESNATADO LIVRE DE ANTIBIÓTICO, UTILIZANDO. Schinus terenbithifolius Raddi (aroeira)A refrigeração do sêmen equino é largamente utilizada na indústria equina para a manutenção do potencial fertilizante dos espermatozoides durante um período prolongado. O uso antibióticos nos extensores é de rotina para minimizar o crescimento bacteriano durante o armazenamento até o momento da inseminação, entretanto, há um receio com respeito ao uso exacerbado de antibióticos levando a resistência antimicrobiana. O presente pedido de patente visa a produção de um diluente para refrigeração de sêmen equino, livre de antibiótico com a adição do extrato da casca do Schinus terenbithifolius Raddi (aroeira) ao diluidor de refrigeração a base de leite desnatado, baseado na reconhecida ação da aroeira em diferentes modelos. Para tal desenvolvemos um estudo testando o extrato da S. terebinthifolius, a partir da casca da planta e tendo como concentração 300 micrograma/mL. Para a Análise microbiológica e determinação da concentração inibitória mínima (CIM), foi aplicado a metodologia de microdiluição em caldo seguindo as recomendações do CLSI, utilizando isolados de Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus e Proteus mirabilis. As microdiluições em placas foram incubadas a 37°C por 24h, sendo realizadas leituras de Densidade Óptica a 600nm no leitor ELISA. A avaliação da cinética espermática foi realizada pelo CASA e integridade de membranas plasmática e acrossomal por microscopia de epifluorescência. As análises estatísticas foram realizadas usando ANOVA e, quando significativo, o teste de Tukey-Kramer foi realizado para comparar as médias. Houve uma resposta de sensibilidade individual de 62,1% com a E. coli, 57,8% com a P. mirabilis e 44,2% e com a S. aureus, Com respeito a cinética espermática, não se observou diferença significativa (p > 0,05) entre o grupo controle e os grupos suplementados com o extrato em suas diferentes concentrações para os parâmetros de motilidade MT e MP e de cinética VCL, VSL, VAP, WOB, ALH e BCF. Com relação aos parâmetros de integridade de membrana plasmática e integridade de acrossoma, não houve diferenças significativas entre grupo controle e tratamentos nos diferentes tempos (2h, 24h e 48h). Dessa forma, acreditamos que essa invenção apresenta um grande avanço com possibilidades futuras de registro como diluente de refrigeração de Sêmen equino livre de antibiótico.