PROTEÍNA MULTIEPÍTOPO RECOMBINANTE PARA DIAGNÓSTICO IMUNOLÓGICO DA COVID-19 E USOS

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Abstract

PROTEÍNA MULTIEPÍTOPO RECOMBINANTE PARA DIAGNÓSTICO IMUNOLÓGICO DA COVID-19 E USOS. A presente inovação aborda o desenvolvimento de uma nova proteína multiepítopo denominada ME-8-9b-N e produzida por via recombinante. As aplicações desta proteína incluem o diagnóstico imunológico da COVID-19, uso como antígeno em kit ELISA e uso na preparação de uma composição imunogênica. Três epítopos foram selecionados das proteínas ORF8, ORF9b e Nucleocapsídeo (N) do SARS-CoV-2. Estas regiões foram modificadas e combinadas para formar a proteína multiepítopo. Após o design da proteína, a sequência de aminoácidos foi convertida em ácidos nucleicos para a construção de um plasmídeo, permitindo expressão heteróloga em Escherichia coli. As bactérias foram transformadas com sucesso, resultando na produção e purificação da proteína recombinante. Em seguida, essa proteína foi aplicada em testes de ensaio imunoenzimático (ELISA indireto) para detecção de anticorpos anti-SARS-CoV-2 dos isotipos Ig Total, IgM e IgG. Para isso, foi utilizado um painel de 30 soros negativos provenientes de indivíduos saudáveis e 66 soros positivos para COVID-19. Os resultados desses testes possibilitam a diferenciação entre indivíduos infectados pelo vírus SARS-CoV-2 e aqueles que não estão, inclusive em casos assintomáticos, com sensibilidade variando de 93,94 a 96,00% e especificidade variando de 93,33 a 100%, dependendo do isotipo de imunoglobulina testada. Além disso, a proteína ME-8-9b-N tem alta antigenicidade, o que indica seu potencial como estimulador de resposta imune. Assim, esta inovação surgiu em resposta aos desafios técnicos existentes e à urgente necessidade de encontrar novos marcadores para diagnóstico imunológico da COVID-19.