PLASMA RICO EM PLAQUETAS COMO SUPLEMENTO NO DILUENTE DE REFRIGERAÇÃO E CONGELAÇÃO DE SÊMEN EQUINO

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Abstract

PLASMA RICO EM PLAQUETAS COMO SUPLEMENTO NO DILUENTE DE REFRIGERAÇÃO E CONGELAÇÃO DE SÊMEN EQUINO. Criopreservação de sêmen é uma ferramenta importante para a conservação e disseminação de material genético superior. Entretanto, a conservação dos espermatozoides pelo frio provoca alterações espermáticas resultando na redução da motilidade, viabilidade e capacidade fertilizante dos espermatozoides. É necessário lançar mão de novas tecnologias para o desenvolvimento de meios de congelação de sêmen. Pesquisas com plasma rico em plaquetas (PRP) nos meios de criopreservação do sêmen de ovinos e humano melhoraram os parâmetros espermáticos, como motilidade, viabilidade, integridade de membrana, fragmentação de DNA, potencial de membrana mitocondrial. Além da melhoria no sêmen, a ação do PRP tem sido descrita como imunomodulador na resposta endometrial inflamatória em éguas, após a inseminação utilizando sêmen congelado. Diante do exposto, o presente pedido de patente visa a produção de um diluente para refrigeração/congelação de sêmen equino, com a adição de PRP. Observamos a eficiência do PRP, adicionado ao diluidor de congelação de sêmen equino, por meio da avaliação dos parâmetros de cinética espermática. Para a obtenção do PRP, amostras de sangue, foram colhidas por venopunção, em tubos contendo 3,8% de citrato de sódio e submetidas a centrifugação. Os ejaculados foram obtidos usando vagina artificial. Para congelação, as amostras foram diluídas em meio de congelação acrescido de PRP (0, 1,25%, 2,5%, e 5%), e congeladas em sistema automatizado. As amostras foram descongeladas e destinadas às avaliações de cinemática espermática, integridade de membranas plasmática (iMP) e acrossomal (iAC), Vitalidade. Análise estatística foi realizada no GraphPad InStat, considerando a significância de P<0.05. Após a adição do PRP. A LIN dos espermatozoides pós-descongelados dos grupos tratados com PRP (2,5% e 5%) foi maior (P <= 0,05) comparado com o grupo controle. Os grupos PRP protegeram a iAC durante o processo de criopreservação. A iAC dos espermatozoides dos grupos PRP (2,5% e 5%) foram maiores (P <= 0,05) em comparação com o controle quanto à membrana acrosomal intacta. Em conclusão, a adição de PRP (1,25%, 2,5% e 5,0%) ao extensor de congelamento aumenta LIN, WOB, IAC e diminui a ALH, mas não altera a cinética de outros parâmetros.