DESENVOLVIMENTO E USO DE LINHAGEM CELULAR CONTÍNUA A PARTIR DE CÉLULAS DE ABELHAS APIS MELLIFERA AFRICANIZADAS

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Abstract

DESENVOLVIMENTO E USO DE LINHAGEM CELULAR CONTÍNUA A PARTIR DE CÉLULAS DE ABELHAS APIS MELLIFERA AFRICANIZADAS. A presente invenção diz respeito ao processo de elaboração e de uso de uma linhagem celular contínua da espécie Apis mellifera. A linhagem foi alcançada utilizandose de 15 a 20 larvas de dois a seis dias de idade, livres dos principais vírus (Vírus Deformador de Asas (DWV), Vírus da Cria Ensacada (SBV), Vírus da Paralisia Aguda (ABPV), Vírus da Realeira Negra (BQCV), Vírus da Paralisia Aguda Israelense (IAPV), Vírus da Paralisia Crônica (CBPV), e os fungos (Nosema ceranae e Nosema apis), que acometem esta espécie de abelhas. Após a antissepsia com solução de hipoclorito de sódio 0,8%, água destilada estéril e álcool 70%, as células foram individualizadas com auxílio de separador celular e colocadas em garrafas de cultivo com meio InsectXPRESSTM, com ou sem adição de soro fetal bovino. A identidade das células foi confirmada através da amplificação do gene endógeno ß-Actina, com posterior sequenciamento dos produtos da PCR e busca de similaridade do consenso contra o banco de dados do GenBank (NCBI), por meio da ferramenta BLAST RefSeqGene (NCBI). A linhagem celular, denominada FFAM-15, servirá como ferramenta para estudo da replicação de microorganismos como vírus, bactérias e fungos, como método diagnóstico destes microorganismos (atualmente realizada apenas por técnicas moleculares, dada a indisponibilidade de linhagens celulares comerciais de abelhas Apis mellifera), bem como ferramenta na avaliação da toxicidade e da resistência de abelhas contra agentes químicos. Por fim, as células poderão ser utilizadas como biorreator, para expressão de proteínas recombinantes.