SEQUÊNCIAS METAESTÁVEIS DE DNA EM FORMA DE GRAMPO E DE RIBOZIMAS QUE ATUAM EM TRANS, E SEU USO CONJUNTO PARA IDENTIFICAÇÃO DE RNA VIRAL DE SARS-COV-2

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Abstract

SEQUÊNCIAS METAESTÁVEIS DE DNA EM FORMA DE GRAMPO E DE RIBOZIMAS QUE ATUAM EM TRANS, E SEU USO CONJUNTO PARA IDENTIFICAÇÃO DE RNA VIRAL DE SARS-COV-2. A presente invenção situa-se no campo da biotecnologia aplicada a diagnósticos e consiste em dois pares de sequências metaestáveis de grampo de DNA contendo os fluoróforos Cyanine 3/Cyanine 5 (Cy3/Cy5) e de ribozimas do tipo hammerhead de ação trans e seu uso conjunto para a detecção do RNA viral de SARS-CoV-2. As ribozimas identificam e clivam o RNA viral alvo de SARS-CoV-2 liberando um pequeno fragmento de RNA viral alvo, conhecido como sequência iniciadora, que leva a uma reação de hibridação em cadeia das moléculas de DNA em forma de grampo contendo os fluoróforos seguida por transferência de energia fluorescente por ressonância para identificação do RNA viral de SARS-CoV-2. A tecnologia tem vantagens para detecção do vírus na fase inicial de infecção, pois é livre de atividade enzimática e também livre de mão de obra e equipamentos especializados. Assim a presente tecnologia evita a complexa logística de distribuição e armazenamento de métodos que exigem refrigeração, que dificultam o uso amplo dos mesmos, além de permitir a realização de diagnósticos longe de grandes centros urbanos.