PROCESSO DE CONSTRUÇÃO DE UM BIOSSENSOR ELETROQUÍMICO PARA DETECÇÃO DE BACTÉRIA PROMOTORA DE CRESCIMENTO VEGETAL

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Abstract

PROCESSO DE CONSTRUÇÃO DE UM BIOSSENSOR ELETROQUÍMICO PARA DETECÇÃO DE BACTÉRIA PROMOTORA DE CRESCIMENTO VEGETAL. A presente invenção consiste na construção de um biossensor eletroquímico de DNA para a detecção quantitativa da Bactéria Promotora de Crescimento Vegetal (BPCV) Azospirillum brasilense. O dispositivo desenvolvido consiste em uma plataforma formada por um eletrodo de carbono vítreo oxidado (ECV-ox) modificado com um nanocompósito formado por nanopartículas de ouro estabilizadas em cloreto de 3-n-propilpiridinio silsesquioxano (AuNPs-SiPy) e nanotubos de carbono oxidados (NTC-ox). A plataforma desenvolvida foi incubada em uma solução contendo uma simples fita de DNA (AZO1) com uma das extremidades tiolada, sendo imobilizada covalentemente na superfície da plataforma. Este biossensor foi capaz de detectar a fita complementar de DNA por meio da hibridização com AZO1, cujo processo pode ser detectado eletroquimicamente e quantificado por voltametria de onda quadrada através da utilização da sonda redox K4Fe(CN)6/K3Fe(CN)6 na concentração de 5,0 mmol L1 em tampão PBS 0,1 mol L-1 . O processo é detectado devido a repulsão que ocorre entre a sonda redox e os grupos fosfatos do DNA, ambos carregados negativamente, provocando a diminuição nos valores de corrente de pico anódico. O dispositivo foi capaz de detectar o genoma de A. brasilense na faixa de 5,0 a 624,5 ng µL-1 , com limite de detecção de 1,11 ng µL-1 e limite de quantificação de 1,37 ng µL-1 . Este biossensor também apresentou estabilidade de 7 semanas, especificidade e capacidade de quantificação mesmo em amostras metagenômicas.