MÉTODO PARA PREPARAR PARTÍCULA SIMILAR A VÍRUS DE SENECAVÍRUS A (SVA) E USO DO MESMO

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Abstract

MÉTODO PARA PREPARAR PARTÍCULA SIMILAR A VÍRUS DE SENECAVÍRUS A (SVA) E USO DO MESMO. Trata-se de um método para preparar uma partícula similar a vírus do Senecavírus A que inclui a construção de vetores de expressão de fusão pSMA, pSMK e pSMC de pequenas proteínas modificadas similares a ubiquitina; construção de um vetor de expressão recombinante de gene de proteína estrutural de SVA; expressão, purificação e experimento de immunoblotting de uma proteína recombinante de SVA; e montagem in vitro de partículas similares ao vírus de SVA. O método combina diferentes marcações de fusão para aprimorar a expressão da proteína alvo e a eficácia de montagem das partículas similares a vírus. Os resultados mostram que, quando o vetor recombinante pGST/VP1 obtido fundindo-se GST ao N-terminal de gene SUMO VP1 é combinado com pSMK/VP0 e pSMC/VP3 para cotransfectar as bactérias de expressão, as bactérias de expressão expressam a proteína solúvel mais preferencial e a taxa de montagem de VLPs é a mais alta. A invenção fornece suporte técnico para promover adicionalmente a pesquisa e aplicação de uma vacina de partícula similar a vírus e acelerar o ritmo de transformação de vacina animal.