CONCENTRADO DE PROTEÍNAS E PEPTÍDEOS DERIVADOS DE CÉLULAS ESTROMAIS MESENQUIMAIS, MÉTODO DE OBTENÇÃO E USO DE CONCENTRADO

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Abstract

CONCENTRADO DE PROTEÍNAS E PEPTÍDEOS DERIVADOS DE CÉLULAS ESTROMAIS MESENQUIMAIS, MÉTODO DE OBTENÇÃO E USO DO CONCENTRADO. A presente invenção se refere a um concentrado de proteínas e peptídeos derivados de células estronais mesenquimais que pode ser empregado pela indústria farmacêutica, ou veterinária, ou cosmética, ou alimentar. O concentrado de proteínas e peptídeos derivado de células estromais mesenquimais é obtido através de processo compreendendo as seguintes etapas: (a) seleção de tecido adiposo subcutâneo ou visceral de animal ou humano; (b) digestão em solução enzimática do tecido e suspensão celular para formação de pellet; (c) cultivo primário de células ocorre com troca do meio de cultivo a cada 72 h; (d) atingidos 80% de confluência o meio de cultivo é descartado e as células são ressuspendidas por ação enzimática; (e) as CTMs (células mesenquimais estromais) são caracterizadas pela sua capacidade de aderência ao plástico, pela expressão dos marcadores de superfície e pelo seu potencial de diferenciação; (f) as CTMs são criopreservadas em criotubos contendo aproximadamente 1 a 5 milhões de células/ criotubo; (g) re-cultivo das células ocorre por forma estática ou em meio agitado ou em biorreatores; (h) no re-cultivo são plaqueadas 4 a 8 milhões de células/1000cm 2 . (i) após confluência celular o meio de cultivo é substituído completamente por meio livre de proteína e fica em repouso por 24 a 96 h; (j) então o sobrenadante livre de debris celulares é separado e congelado, obtendo-se assim um concentrado de proteínas e peptídeos apresentando de 1.200 a 2.500 microgramas de proteína total/ml do meio condicionado (MC).