L-ASPARAGINASE MODIFICADA DERIVADA DE PENICILLIUM SIZOVAE, SEQUÊNCIA DE NUCLEOTÍDEOS, MÉTODO DE OBTENÇÃO, EXPRESSÃO EM KOMAGATAELLA PHAFFII, MICROORGANISMO TRANSGÊNICO, COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS, E USO PARA O TRATAMENTO DE NEOPLASIAS LEUCÊMICAS

IPC Classification

Abstract

L-ASPARAGINASE MODIFICADA DERIVADA DE PENICILLIUM SIZOVAE, SEQUÊNCIA DE NUCLEOTÍDEOS, MÉTODO DE OBTENÇÃO, EXPRESSÃO EM KOMAGATAELLA PHAFFII, MICROORGANISMO TRANSGÊNICO, COMPOSIÇÕESFARMACÊUTICAS, E USO PARA O TRATAMENTO DE NEOPLASIAS LEUCÊMICAS. A presente invenção descreve um método de obtenção de uma L-asparaginase (L-ASNase) recombinante, bem como a referida enzima recombinante e seu uso em composições farmacêuticas para o tratamento de neoplasias malignas leucêmicas. A invenção também abrange a sequência de nucleotídeos modificada e o microrganismo transgênico contendo tal. Trata-se de um método de obtenção de LASNase recombinante modificada oriunda de fungo filamentoso isolado do solo do Cerrado do Centro-Oeste Brasileiro, identificado como Penicillium sizovae, expressa por uma linhagem de levedura, Komagataella phaffii (Pichia pastoris) X33, induzida por metanol. A produção intracelular desta enzima recombinante é 3 vezes superior àquela quantificada nas células do fungo P. sizovae, após 48 horas de cultivo. A L-ASNase da presente invenção possui atividade de asparaginase tipo II, uma enzima periplasmática com maior atividade de asparaginase em relação à atividade de glutaminase. Além disso, a L-ASNase de P. sizovae aqui obtida é similar a aquela do microrganismo Dickeya chrysanthemi (sin. Erwinia chrysanthemi), cuja enzima é uma das três formulações industrializadas atualmente em uso na terapêutica para o tratamento de leucemia linfoblástica aguda.