MÉTODO MOLECULAR E USO PARA DETECÇÃO E QUANTIFICAÇÃO DE TRYPANOSOMA CRUZI VIÁVEL POR REAÇÃO EM CADEIA POLIMERASE EM ALIMENTOS

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Abstract

MÉTODO MOLECULAR E USO PARA DETECÇÃO E QUANTIFICAÇÃO DE Trypanosoma cruzi VIÁVEL POR REAÇÃO EM CADEIA POLIMERASE EM ALIMENTOS. A presente invenção refere-se a um método molecular para a detecção e quantificação molecular de Trypanosoma cruzi viável em alimentos compreendendo as etapas de construção dos oligonucleotídeos iniciadores específicos para T. cruzi (TcI a TcIV) e que não produza amplificação para organismos não-alvo; recuperação do T. cruzi em amostra de alimentos; extração de DNA do T. cruzi recuperado de amostra de alimentos; extração de mRNA do T. cruzi recuperado de amostra de alimentos; Preparo as mistura de reagentes, purificação do mRNA extraído e síntese de cDNA; Amplificação da sequência-alvo de ácidos nucleicos por PCR tradicional; Amplificação da sequência-alvo de ácidos nucleicos por PCR em tempo real. Trata-se de um método rápido, sensível e específico para a determinação simultânea de T. cruzi viável ou não-viável e quantificação de parasitas em amostras de alimentos. O método é eficiente no controle de qualidade de alimentos na garantia da inocuidade e segurança de alimentos.