SEQUÊNCIA DE DNA, PRODUÇÃO E PURIFICAÇÃO DA LECTINA RECOMBINANTE DE CANAVALIA BONARIENSIS EM ESCHERICHIA COLI

IPC Classification

Abstract

SEQUÊNCIA DE DNA, PRODUÇÃO E PURIFICAÇÃO DA LECTINA RECOMBINANTE de Canavalia bonariensis EM Escherichia coli. O reconhecimento entre proteínas e carboidratos é fundamental em muitos processos biológicos, tais como infecções virais, bacterianas e parasitárias,separação de células e componentes solúveis, fertilização, crescimento,diferenciação e metástase do câncer. Modificações nos padrões de glicosilação presentes nessas células afetadas são indícios marcantes dessas patologias e progressão da doença. Dentro dessa problemática o uso de lectina pode facilitar,portanto, a descoberta e purificação de novos biomarcadores, tendo em vista que são proteínas capazes de se ligar de modo específico e reversível a carboidratos. Dentre as lectinas vegetais, as mais extensivamente estudadas são as isoladas a partir das espécies pertencentes à família das leguminosas,com destaque neste trabalho a lectina de Canavalia bonariensis (CaBo), uma lectina glicose/manose específica, amplamente estudada, que apresentou efeito citotóxico sobre culturas celulares de glioma das linhagens C6 (rato). Dessa forma, diante deste potencial biotecnológico relatado para essa lectina esta invenção traz a produção da forma recombinante da CaBo em sistema heterólogo utilizando E. coli BL21 (DE3) como célula de expressão, englobando desde a concepção do gene sintético codificante para a rCaBo até o seu processo de purificação.