FRAGMENTO VARIÁVEL DE CADEIA SIMPLES (SCFV) DE ANTICORPO MURINO RECOMBINANTE DETECTA HORMÔNIO DHEA EM TECIDOS HUMANOS

IPC Classification

Abstract

Fragmento variável de cadeia simples (ScFv) de anticorpo murino em sua forma recombinante detecta hormônio DHEA emamostras humanas". O hormônio dehidroepiandrosterona é um marcador de carcinoma adrenocortical (CAC), pois o seu aumento na circulação pode ser proporcional à massa tumoral, por isso o interesse em desenvolver uma molécula capaz de detectar o hormônio. Para tanto, o hormônio DHEA foi conjugado com KLH e usado como imunógeno para obter hibridomas, de origem murina, anti-DHEA. Dos hibridomas secretores de imunoglobulina M (IgM) específica para o DHEA, foram obtidos RNAs mensageiros (RNAm) codificantes da cadeia leve e pesada do anticorpo IgM denominado 5B7. Esse RNAm foi usado como molde para a síntese de fita de DNA complementar (cDNA) o qual foi sequenciado e clonado em vetor de expressão de proteínas. Como produto obteve-se uma proteína recombinante que consiste no scFv que reconhece a molécula de DHEA de maneira muito semelhante à molécula parental. O scFv recombinante provou-se ser eficiente na detecção de DHEA no tecido adrenal normal e nas células de CAC permitindo a localização tecidual do DHEA.