MÉTODO PARA OBTER VARIANTE NATURAL DE ENZIMA E CELOBIO-HIDROLASE SUPER-TERMOESTÁVEL

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Abstract

MÉTODO PARA OBTER VARIANTE NATURAL DE ENZIMA E CELOBIO-HIDROLASE SUPER-TERMOESTÁVEL. Um método para se obter, seletivamente, um variante natural de uma enzima que tem atividade que inclui (1) uma etapa de detectar uma sequência de ORF de uma proteína que tem atividade de enzima a partir de um banco de dados de genoma que inclui sequências de bases de DNA metagenômico da microbiota ambiental; (2) uma etapa de obter pelo menos um clone de PCR que inclui a sequência de ORF que tem um comprimento completo, uma sequência parcial da sequência de ORF ou uma sequência de base que codifica uma sequência de aminoácidos que é formada através da deleção, substituição ou adição de pelo menos um resíduo de aminoácido em uma sequência de aminoácidos codificada pela sequência de ORF, realizando-se a clonagem de PCR em pelo menos um DNA metagenômico da microbiota ambiental através do uso de um iniciador projetado com base na sequência de ORF; (3) uma etapa de determinar uma sequência de base e uma sequência de aminoácidos que é codificada através da sequência de base para cada clone de PCR obtido na etapa (2); e (4) uma etapa de selecionar uma variante natural de uma enzima que tem atividade através da medição de atividade de enzima de proteínas codificada por cada clone de PCR obtido na etapa (2).