COMPOSIÇÃO PARA REAÇÃO DE TRANSCRIÇÃO REVERSA HOT-START, MÉTODOS DE PREPARAÇÃO, E KIT PARA REAÇÃO DE TRANSCRIÇÃO REVERSA HOT-START

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Abstract

COMPOSIÇÃO PARA REAÇÃO DE TRANSCRIÇÃO REVERSA HOT-START, MÉTODOS DE PREPARAÇÃO, E KIT PARA REAÇÃO DE TRANSCRIÇÃO REVERSA HOT-START a presente invenção refere-se a uma composição para reação de transcrição reversa hot-start e uma composição para a PCR de transcrição reversa, mais particularmente a uma composição de reação obtida através da adição de pirofosfato e pirofosfatase á uma solução aquosa contendo solução tampão de reação, MgCl2, quatro tipos de dNTPs, e polimerase de transcrição reversa em um nico tubo de reação, e uma composição para reação de transcrição reversa hot-start obtida por congelamento ou secagem da composição de reação e tendo uma maior estabilidade e estabilidade de armazenamento a longo prazo. Além disso refere-se a uma composição que compreende DNA polimerase na composição para reação de transcrição reversa hot-start, e, portanto, permite uma reação de transcrição reversa hot-start e reação PCR a serem executadas sequencialmente, e a um método para amplificar ácido nucleico da mesma. Em comparação com as composições convencionais para a reação de transcrição reversa, a composição da invenção pode evitar as reações de transcrição reversa não específicas durante a mistura em temperatura ambiente e pode realizar seletivamente a transcrição reversa do RNA alvo em temperatura de reação, tornando possvel amplificar o produto de transcrição reversa por PCR com alta sensibilidade.