PROCESSO DE ESTABELECIMENTO DE SISTEMA HETERÓLOGO DE BIOENSAIOS DE MORTALIDADE-SHBM- CONTRA INSETOS-PRAGA FITÓFAGOS DE CEREAIS E OUTRAS CULTURAS

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Abstract

PROCESSO DE ESTABELECIMENTO DE SISTEMA HETERÓLOGO DE BIOENSAIOS DE MORTALIDADE - SHBM - CONTRA ENSETOS-PRAGA FITÓFAGOS DE CEREAIS E OUTRAS CULTURAS A presente invenção é relacionada a um processo de laboratório que permite a utilização, por exemplo, de plantas de tabaco, Nicotiana tabacum L. como fonte de alimento não-tóxica para insetos-praga fitófagos de cereais, constituindo-se em um Sistema Heterólogo de I3ioensaios de Mortalidade (SHBM) rápido e eficaz para a avaliação da eficiência in vivo (in planta) de transgenes codificadores de toxinas entomocidas. Foi possível estabelecer tal sistema de avaliação devido à descoberta especifica de que plantas de tabaco, normalmente tóxicas a vários insetos fitófagos de cereais e de outras plantas, não apresentam esta capacidade inseticida quando mantidas in vitro, i.e. em em meios de cultura de tecido com ausência de hormônio cinetina. Como plantas de tabaco transgênicas contendo transgenes entomocidas necessariamente passam por cultura de tecido, tem-se que, ao se manter tais plantas transgênicas in vitro, qualquer efeito de mortalidade em insetos alimentados com essas plantas será devido à ação do transõene entomotóxico e, portanto, indicará a eficiência in planta do mesmo. O uso de tal SHBM tem extrema utilidade para cereais e outras espécies de plantas que sejam recalcitrantes à transformação e regeneração in vitro, cujos protocolos são difíceis, demorados e ineficientes. Além disso, essas espécies não são hospedeiros adequados à Agrobacterium tumefaciens, que constitui método preferencial na obtenção de plantas transgênicas. O tabaco, ou outra espécie qualquer que seja facilmente transformável por A. tumefaciens e regenerável in vitro, torna-se ferramenta utilíssima como SHBM, permitindo avaliações rápidas in planta da eficiência de construções gênicas contendo genes entomocidas.